抗獨(dú)特型抗體
1. 什么是抗獨(dú)特型抗體?
抗獨(dú)特型抗體（Anti-idiotypic antibody）是一種能夠特異性結(jié)合另一抗體的獨(dú)特位（paratope）的抗體。獨(dú)特位（paratope）是抗體分子上的一個(gè)特殊區(qū)域，也稱為可變區(qū)域或抗原結(jié)合位點(diǎn)。獨(dú)特型由多個(gè)抗原決定簇（Antigenic determinant）組成，每個(gè)抗原決定簇都是一個(gè)獨(dú)特位。抗原決定簇或獨(dú)特位可存在于重鏈可變區(qū)，也可存在于輕鏈可變區(qū)，或者存在于兩條鏈組成的表面。
即使是同一種屬、同一個(gè)體來源的抗體分子，其免疫原性亦不盡相同。獨(dú)特型是每個(gè)抗體分子所特有的抗原特異性標(biāo)志，其表位被稱為獨(dú)特位(idiotope)?？贵w分子每一Fab段約有5~6個(gè)獨(dú)特位，它們存在于V區(qū)。獨(dú)特型在異種、同種異體甚至同一個(gè)體內(nèi)均可刺激產(chǎn)生相應(yīng)抗體，即抗獨(dú)特型抗體。
抗獨(dú)特型抗體，起源于Ab1-Ab2-Ab3的獨(dú)特型網(wǎng)絡(luò)理論，獨(dú)特型網(wǎng)絡(luò)由 Niels Jerne 于 1974 年提出，包括獨(dú)特型 (Ab1)、抗 ID 抗體（也稱為 Ab2）和抗原呈遞細(xì)胞。根據(jù)網(wǎng)絡(luò)理論，表位或抗原決定簇的存在刺激抗原特異性抗體（Ab1）的產(chǎn)生，隨后誘導(dǎo)抗ID抗體（Ab2）的產(chǎn)生以維持平衡。Ab2根據(jù)其抗原結(jié)合位點(diǎn)分為Ab2α、Ab2β或Ab2γ（圖1），最近又新確定兩個(gè)類別即Ab2δ和 Ab2ε。Ab2α針對(duì)Ab1的獨(dú)特位，而Ab2γ針對(duì)Ab1的靠近抗原表位結(jié)合位點(diǎn)的獨(dú)特位，Ab2β 攜帶與 Ab1 互補(bǔ)位的內(nèi)部圖像結(jié)合位點(diǎn)，并與 Ab1 的互補(bǔ)決定區(qū)結(jié)合，在結(jié)構(gòu)上模仿 Ab1。Ab2 能夠刺激抗抗 ID (Ab3) 的產(chǎn)生，其與 Ab1 具有相似的結(jié)合能力，形成一個(gè)相互制約、相互連鎖的獨(dú)特型網(wǎng)絡(luò)。這種網(wǎng)絡(luò)理論使得抗ID抗體的產(chǎn)生能夠通過中和和抑制自身抗體的分泌來調(diào)節(jié)自身抗體，最終有助于預(yù)防自身免疫性疾病 [1]。
圖1. 獨(dú)特性網(wǎng)絡(luò)理論
2. 抗獨(dú)特型抗體的分類
根據(jù)它們與抗體藥物的相互作用和檢測(cè)方式，抗獨(dú)特型抗體又分為3種。
第一種是抗原阻斷型抗獨(dú)特型抗體（即抗原中和型抗獨(dú)特型抗體），該類型抗體藥物的抗原表位和獨(dú)特型互相重疊，因此抗體藥物的靶向抗原和抗獨(dú)特型抗體將互相競(jìng)爭(zhēng)。因此，這種類型的抗獨(dú)特型抗體只能檢測(cè)游離型抗體藥物。
第二種類型的抗獨(dú)特型抗體被稱為非阻斷型（即抗原非中和型抗獨(dú)特型抗體），因?yàn)榭贵w藥物的抗原表位和獨(dú)特型不重疊。因此，抗獨(dú)特型抗體和抗原可以同時(shí)結(jié)合到抗體藥物上，而不會(huì)影響彼此的結(jié)合能力。該類抗體不具有抗體結(jié)合區(qū)特異性，治療性抗體仍可與其目標(biāo)抗原相結(jié)合。這種類型的抗獨(dú)特型抗體可用于檢測(cè)抗體藥物總量。
第三種類型的抗獨(dú)特型抗體是復(fù)合特異型抗獨(dú)特型抗體（即藥物靶標(biāo)復(fù)合型抗獨(dú)特型抗體）。僅特異性地識(shí)別抗體-靶標(biāo)復(fù)合物，不與未結(jié)合的抗體或未結(jié)合的目標(biāo)抗原相結(jié)合。這種類型的抗獨(dú)特型抗體僅能檢測(cè)已結(jié)合的抗體藥物。
| 類型 | 抗原中和型 | 非中和型 | 藥物-靶標(biāo)復(fù)合物型 |
| 應(yīng)用范圍 | PK檢測(cè) | 免疫原性評(píng)價(jià) | |
| 特性 | 抗體結(jié)合區(qū)域特異性 | 非抗體結(jié)合區(qū)特性 | 藥物靶標(biāo)復(fù)合物特異性 |
| 抗原結(jié)合性 | 抑制性和中和型 | 無抑制性 | 無抑制性 |
| 應(yīng)用 | 靶標(biāo)阻斷，檢測(cè)游離藥 | 靶標(biāo)非阻斷，檢測(cè)總藥 | 靶標(biāo)非阻斷，檢測(cè)結(jié)合型藥物 |
| 原理圖 |
 |
 |
 |
| 優(yōu)勢(shì) | 單一表位
特異性好 批次間穩(wěn)定性好 |
可以模擬血樣中真實(shí)情況
制備周期相對(duì)較短 成本低 |
3. 抗獨(dú)特型抗體的應(yīng)用
抗獨(dú)特型抗體細(xì)分有單克隆抗體和多克隆抗體，兩者在具體應(yīng)用中稍有差別。
單克隆抗體特異性強(qiáng)、均一性好，經(jīng)常用于臨床前藥學(xué)研究及臨床階段的獨(dú)特型抗體測(cè)定?？躬?dú)特型抗體單抗可特異性識(shí)別生物藥的獨(dú)特位點(diǎn)，在藥代動(dòng)力學(xué)研究中用于動(dòng)物及人血清中抗體藥的含量測(cè)定。
多克隆抗體覆蓋率高，較大限度的模擬抗藥物抗體的情況，通常推薦抗獨(dú)特型多抗用做抗藥物抗體檢測(cè)的陽性對(duì)照，及免疫原性評(píng)價(jià)。
目前，抗獨(dú)特型抗體已經(jīng)被應(yīng)用到抗體化藥物的免疫原性分析、治療性抗體的臨床前研究、抗藥物抗體的臨床開發(fā)、配體中和試驗(yàn)和抗體阻斷試驗(yàn)的對(duì)照、以及抗體藥物的藥代動(dòng)力學(xué)（PK）和藥效學(xué)（PD）分析等。
● 免疫原性分析
免疫原性分析對(duì)于生物藥物開發(fā)具有重要的意義。幾乎所有的生物制藥產(chǎn)品（如蛋白、抗體、多肽偶聯(lián)藥物或寡核苷酸等）都會(huì)誘導(dǎo)機(jī)體內(nèi)免疫應(yīng)答，從而導(dǎo)致抗藥抗體（ADA）的產(chǎn)生。使用免疫原性檢測(cè)方法優(yōu)勢(shì)明顯：具有高靈敏性 (<100ng/mL);可覆蓋所有亞型ADA抗體檢測(cè) (lgG、lgM、lgE等)；Anti-ID 抗體作為陽性對(duì)照抗體，建立檢測(cè)方法學(xué)驗(yàn)證；可設(shè)立陰性個(gè)體對(duì)照 (未給藥個(gè)體、健康個(gè)體\目標(biāo)疾病群體)
抗獨(dú)特型抗體屬于高度特異性ADA。多克隆抗體能較大限度地模擬血樣中的真實(shí)情況，還具有制備周期較短和成本低的優(yōu)勢(shì)。因此，大多數(shù)情況下，在分析患者樣本中是否存在ADA時(shí)，抗獨(dú)特型多克隆抗體通常用作陽性對(duì)照。
● 藥代動(dòng)力學(xué)（PK）分析
抗獨(dú)特型抗體也是藥代動(dòng)力學(xué)（PK）分析的關(guān)鍵工具試劑之一。在臨床前研究和臨床研究中，PK分析可用于評(píng)估抗體藥物的用藥劑量和毒性。
抗獨(dú)特型單克隆抗體特異性強(qiáng)，可作為PK分析的檢測(cè)試劑，用于檢測(cè)人或動(dòng)物血清中的抗體藥物含量。具體而言，臨床醫(yī)生需確定不同患者群體中藥物吸收、分布、生物利用度和排泄的速率。為了實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)，研究人員需要能夠在藥物輸送后的不同時(shí)間點(diǎn)跟蹤抗體藥物是否與其指定的靶標(biāo)結(jié)合或未結(jié)合。通過使用主要是單克隆抗體（mAbs）的抗獨(dú)特型抗體，各種形式的抗體治療藥物可以在患者的血清、血液、尿液或其他體液中輕松追蹤和定量化。
4. CUSABIO抗獨(dú)特型抗體產(chǎn)品定制服務(wù)
根據(jù)待檢測(cè)抗體藥的類型，CUSABIO可提供抗原中和型、非中和型以及藥靶復(fù)合型的開發(fā)制備服務(wù)。同時(shí)，為了滿足客戶多樣化需求，還可提供從抗原制備到單克隆抗獨(dú)特型抗體，多克隆抗獨(dú)特型抗體，藥代動(dòng)力學(xué)檢測(cè)等多類型服務(wù)。
| 定制服務(wù) | 客戶提供 | 制備周期（天） | 交付標(biāo)準(zhǔn) | 應(yīng)用范圍 |
|---|---|---|---|---|
| 抗Fab鼠單克隆抗體 | 10mg全長(zhǎng)陽性抗體 | 80-100 | ① 3-5株雜交瘤細(xì)胞株； ② 2mg單抗（SDS-PAGE檢測(cè)純度達(dá)95%以上）； ③ 全套檢測(cè)報(bào)告 |
藥代動(dòng)力學(xué)檢測(cè) |
| 抗Scfv鼠單克隆抗體 | scFv抗體序列 | 110-130 | ① 3-5株雜交瘤細(xì)胞株； ② 2mg單抗（SDS-PAGE檢測(cè)純度達(dá)95%以上）； ③ 全套檢測(cè)報(bào)告 |
藥代動(dòng)力學(xué)檢測(cè) |
| 抗獨(dú)特型兔多克隆抗體制備 | 30mg全長(zhǎng)陽性抗體 | 45-55 | ① 免疫前血清1mL； ② 2mg兔多抗（效價(jià)保證1:64000，SDS-PAGE檢測(cè)純度達(dá)95%以上）； ③ 全套檢測(cè)報(bào)告 |
免疫原性評(píng)價(jià) |
參考文獻(xiàn)：
[1].Pan S Y, Chia Y C, Yee H R, et al. Immunomodulatory potential of anti-idiotypic antibodies for the treatment of autoimmune diseases[J]. Future science OA, 2020, 7(2): FSO648.
