先導(dǎo)抗體分子發(fā)現(xiàn)服務(wù)

抗體藥以細(xì)胞、基因工程技術(shù)為主體的抗體工程技術(shù)進(jìn)行制備，與靶抗原結(jié)合具有高特異性、有效性和安全性，臨床用于惡性腫瘤與自身免疫疾病等重大疾病，是發(fā)展迅速的生物制劑藥物，近年來成為新藥開發(fā)中主要的類別。

抗體藥的研發(fā)，從最初的確定靶點(diǎn)，到篩選先導(dǎo)分子，做臨床前研究，再到進(jìn)入臨床1/2/3期試驗，以及完成最后的NDA申報，整個流程至少需要耗費(fèi)10年的時間。在整個抗體藥物研發(fā)過程中，治療性抗體的發(fā)現(xiàn)是抗體藥物開發(fā)的最初階段，也是至關(guān)重要的。

華美生物17年來一直致力于蛋白質(zhì)和抗體的研發(fā)和生產(chǎn)，并且已經(jīng)成功地為多家制藥公司篩選了100多個治療性抗體候選物，其中許多已經(jīng)進(jìn)入了CMC或IND階段。對于一些具有挑戰(zhàn)性的靶點(diǎn)，包括CLDN18.2、CLDN6、CCR8、SSTR2、DLL3、LY6G6D、ROR1、SEMA4D、GPC3、CD16A等，我們不僅成功生產(chǎn)了抗原，還成功篩選出相應(yīng)的重組抗體。

華美生物擁有5大蛋白表達(dá)系統(tǒng)，針對多次跨膜蛋白表達(dá)的三大技術(shù)平臺（VLPs、去垢劑、Nanodisc），針對小分子量蛋白表達(dá)的Nanoparticle平臺，已成功完成30多個針對多次跨膜蛋白的篩選服務(wù)項目。優(yōu)秀的抗原制備技術(shù)平臺以及豐富的抗體篩選經(jīng)驗，保證了華美生物可為您提供從目標(biāo)到治療性抗體候選物的一站式解決方案，加快整個藥物開發(fā)進(jìn)程。

服務(wù)流程

一、原材料準(zhǔn)備

● 抗原制備

華美生物擁有16年重組蛋白表達(dá)經(jīng)驗，可提供從基因合成、載體構(gòu)建到蛋白表達(dá)及純化的一站式服務(wù)。針對藥靶蛋白，在原有的五大重組蛋白表達(dá)系統(tǒng)（大腸桿菌、酵母、昆蟲細(xì)胞、哺乳動物細(xì)胞和無細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng)）的基礎(chǔ)上，經(jīng)過不斷探索與優(yōu)化，華美生物現(xiàn)已推出四大優(yōu)勢藥靶蛋白表達(dá)平臺，分別是病毒樣顆粒 (VLPs) 技術(shù)平臺、去垢劑技術(shù)平臺、Nanodisc技術(shù)平臺和Nanoparticle 表達(dá)平臺。

病毒樣顆粒 (VLPs) 技術(shù)平臺-跨膜蛋白

展示多次跨膜蛋白的天然構(gòu)象，具有完整生物活性
可提高免疫原性，打破機(jī)體自身的免疫耐受
包膜VLPs中靶抗原豐度高于過表達(dá)細(xì)胞
大小為100-150nm，是噬菌體展示的最佳靶點(diǎn)
可用于免疫/ELISA/SPR/BLI，助力先導(dǎo)抗體發(fā)現(xiàn)

Nanodisc技術(shù)平臺-跨膜蛋白

近似于細(xì)胞膜環(huán)境，展示完整構(gòu)象，保持生物活性
不含去垢劑，適用于對去垢劑有干擾的實驗
可直接用于噬菌體篩選（提供空nanodisc反篩）
可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/細(xì)胞實驗

去垢劑技術(shù)平臺-跨膜蛋白

可全長表達(dá)多次跨膜蛋白，不僅僅只限于ECD表位
可精確定量，區(qū)別于VLPs和Nanodisc平臺
可應(yīng)用于免疫/ELISA/SPR/BLI

Nanoparticle 表達(dá)平臺-小分子量蛋白

展示天然構(gòu)象，具有完整生物活性
可增強(qiáng)免疫反應(yīng)
可直接用于噬菌體篩選（提供空的Nanoparticle反篩）
可用于免疫/ELISA/SPR/BLI/細(xì)胞實驗

● 陽性抗體制備

陽性抗體又稱藥物對照抗體，通常用于檢測抗原或穩(wěn)定細(xì)胞株，以確定抗原或穩(wěn)定細(xì)胞株是否合格。此外，它還可作為篩選FACS（熒光激活細(xì)胞分選）抗體的對照。陽性抗體的優(yōu)先順序如下：上市的抗體藥物，臨床階段（Ⅰ-Ⅲ）的抗體藥物，臨床前階段的抗體藥物，以及FACS抗體。

● 穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建

穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株是指通過穩(wěn)定轉(zhuǎn)導(dǎo)持續(xù)穩(wěn)定表達(dá)或干擾特定基因表達(dá)的細(xì)胞系。在抗體開發(fā)領(lǐng)域，穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株可以作為免疫原刺激動物的特異性免疫反應(yīng)，可針對多跨膜蛋白的靶點(diǎn)。此外，穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株廣泛用于抗體結(jié)合和功能篩選實驗。華美生物可提供穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)，具體服務(wù)內(nèi)容如下：

序列	步驟	服務(wù)內(nèi)容	周期
慢病毒包裝構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞服務(wù)
1	表達(dá)載體構(gòu)建	密碼子優(yōu)化、全基因合成、構(gòu)建慢病毒表達(dá)載體，質(zhì)粒大抽	2-3周
2	慢病毒包裝	將表達(dá)載體和輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)293T細(xì)胞，進(jìn)行慢病毒包裝	1-2周
3	Cell pool篩選及驗證	用相應(yīng)篩選劑篩選出陽性細(xì)胞，檢測cell pool表達(dá)量	1-2周
4	單克隆篩選及驗證	單細(xì)胞進(jìn)行鋪板，并驗證單克隆表達(dá)量	3-4周
5	單克隆凍存及QC	單克隆擴(kuò)大培養(yǎng)、凍存、復(fù)蘇檢測活率及微生物污染	1-2周
總時間			8-12周

CELL POOL檢測

單克隆篩選

二、小鼠免疫

GMP級別動物房

多種類型的小鼠

多種免疫方案

三、抗體篩選

華美生物具有十六年豐富雜交瘤單抗開發(fā)經(jīng)驗，技術(shù)路線成熟，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠，高成功率。初步陽性率高達(dá)20%-40%左右，流式陽性率達(dá)到10%-20%左右，可滿足不同類型客戶需求。

四、質(zhì)控（抗體功能檢測）

針對篩選獲取的先導(dǎo)分子抗體，華美生物會根據(jù)客戶需求進(jìn)一步做抗體功能檢測，包括抗原ELISA、細(xì)胞FACS、抗原SPR及抗原binning檢測?？乖璄LISA和抗原SPR主要檢測抗原抗體的結(jié)合活性與親和力，細(xì)胞FACS檢測抗體與細(xì)胞的結(jié)合活性，抗原binning檢測鑒定篩選的先導(dǎo)抗體分子和陽性抗體識別的抗原表位是否一致。