哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)與純化

系統(tǒng)優(yōu)勢

• 無自產(chǎn)內(nèi)毒素；
• 可以分泌表達(dá)；
• 具有復(fù)雜的N型糖基化和準(zhǔn)確的O型糖基化等多種翻譯后加工功能；
• 在分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和生物學(xué)功能等方面，哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的蛋白最接近于天然蛋白。

服務(wù)優(yōu)勢

• 高性價(jià)比，價(jià)格低至至8600元起；
• 貨期短：最短35工作日即可交付；
• 產(chǎn)量高，最高可達(dá)100mg/L。

我們承諾

注：該無風(fēng)險(xiǎn)定制蛋白服務(wù)僅適用于800個(gè)氨基酸以內(nèi)的蛋白質(zhì)。如果您需要表達(dá)超過800個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)，我們將按步驟收費(fèi)。

特色表達(dá)體系

● pSecTag2A-JT載體+HEK293細(xì)胞高效表達(dá)

• 攜帶有CMV強(qiáng)啟動(dòng)子，含有IgK信號(hào)肽可高效分泌表達(dá)；
• N端含有10xHis較常規(guī)6xHis在IMAC中具有更強(qiáng)結(jié)合能力，同時(shí)含有凝血酶位點(diǎn)可去除標(biāo)簽得到無標(biāo)簽蛋白；
• C端含有MYC-tag可應(yīng)用于標(biāo)簽WB檢測，較His-tag具有更強(qiáng)靈敏度；
• Amp抗性篩選。

案例展示

案例1：哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)高表達(dá)目的蛋白

眾所周知，哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)量比較低，該蛋白經(jīng)過我公司的哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)化表達(dá)后，將培養(yǎng)基上清進(jìn)行SDS-PAGE檢測即可觀察到目的條帶，純化后經(jīng)檢測，蛋白表達(dá)量高達(dá)10mg/L。該蛋白理論分子量大小為42kDa，跑膠顯示有糖基化修飾，后經(jīng)LC-MS/MS進(jìn)一步檢驗(yàn)得到確認(rèn)。

蛋白純化圖

泳道1：穿透液
泳道2：培養(yǎng)基原液
泳道3：Marker
泳道4：20 mM咪唑洗脫液
泳道5：60 mM咪唑洗脫液

案例2：哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)高表達(dá)全長抗體

三種全長抗體采用我公司的載體轉(zhuǎn)染HEK293/CHO細(xì)胞后，經(jīng)SDS-PAGE檢測，可以在培養(yǎng)基上清中看到明顯的條帶，兼顧周期及產(chǎn)量，瞬轉(zhuǎn)表達(dá)產(chǎn)量可達(dá)100mg/L 。

蛋白純化圖

泳道1：抗體1培養(yǎng)基原液
泳道2：抗體1穿透液
泳道3：抗體1洗脫液
泳道4：抗體2培養(yǎng)基原液
泳道5：抗體2穿透液
泳道6：Marker
泳道7：抗體2洗脫液
泳道8：抗體3培養(yǎng)基原液
泳道9：抗體3穿透液
泳道10：抗體3洗脫液