二抗
二抗是在其它宿主體內(nèi)制備的能與一抗或一抗片段結(jié)合的抗體,上面通常連有酶或熒光素等標(biāo)簽。由于二抗所具備的優(yōu)點(diǎn)使得其在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中得以應(yīng)用廣泛,如蛋白質(zhì)印記(WB),酶聯(lián)免疫吸附(ELISA),免疫組織化學(xué)(IHC),免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC),流式細(xì)胞術(shù)(FC)及免疫沉淀(IP)。二抗針對某一特定物種的所有抗體均具有特異性,因而使用標(biāo)記的二抗可以去對每一個(gè)一抗進(jìn)行標(biāo)記,大大節(jié)省了時(shí)間和費(fèi)用;此外,一個(gè)一抗分子可以同時(shí)結(jié)合幾個(gè)二抗分子,從而使信號大大增強(qiáng),提高了實(shí)驗(yàn)靈敏度。
華美生物二抗具有反應(yīng)種屬廣、作用效果強(qiáng)和標(biāo)記豐富等特點(diǎn),可應(yīng)用于IF、FC、ELISA、WB、IHC和ICC等實(shí)驗(yàn)類型。
產(chǎn)品列表
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引用文獻(xiàn)
Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) Antibody;HRP-conjugated referenced in "Removal of Copper in Microdroplets by Ovomucoid Hydrolysates Bound to Reverse-Phase Chromatography Media Within Pipette Tips" Applied Biochemistry and Biotechnology, 2019
Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) Antibody;HRP-conjugated referenced in "microRNA-98 inhibits the proliferation, invasion, migration and promotes apoptosis of breast cancer cells by binding to HMGA2" Bioscience Reports, 2018
Rabbit anti-Human IgG Fc Antibody;HRP conjugated referenced in "Hyaluronic acid-endostatin2-alft1 (HA-ES2-AF) nanoparticle-like conjugate for the target treatment of diseases" Journal of Controlled Release, 2018
Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) Antibody;HRP conjugated referenced in "Effects of microRNA-10a on synapse remodeling in hippocampal neurons and neuronal cell proliferation and apoptosis through the BDNF-TrkB signaling pathway in a rat model of Alzheimer's disease" J Cell Physiol, 2017
關(guān)于二抗
檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇,同時(shí)在后繼試驗(yàn)中也會(huì)有不同的檢測方案,因此在選擇二抗的時(shí)候要綜合考慮一抗的類型及后繼檢測方案的要求,其中如何根據(jù)一抗的種屬來源和類型選擇二抗尤為重要。這里匯總了一些選擇的要點(diǎn):
- 一抗的種屬來源
二抗應(yīng)選用與使用的一抗相同的物種來源,例如:如果你的一抗是小鼠源的單克隆抗體,二抗則選抗小鼠的二抗;如果一抗是從兔血清里制備的兔多克隆抗體,則相應(yīng)的二抗需要選擇抗兔的二抗。
- 一抗是屬于哪個(gè)類或亞類
除了要與一抗的種屬來源相一致,二抗還需與一抗的類別或亞類相匹配,這通常是針對單克隆抗體而言。一般來說多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體。而單克隆抗體則相對復(fù)雜些,由于單克隆抗體有不同的類別和亞型,因此相應(yīng)的二抗也需要根據(jù)這些亞型進(jìn)行選擇。
- 二抗的種屬來源
一般來說,不同的種屬來源與二抗的質(zhì)量沒有必然的聯(lián)系,來源于山羊的二抗與來源于驢的二抗在一般的實(shí)驗(yàn)里沒有太多的差別。但是在一些特殊的實(shí)驗(yàn)里,如雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)里,如果其中一個(gè)一抗是山羊來源的,一個(gè)是小鼠來源的,則相應(yīng)的二抗分別要抗山羊和抗小鼠的二抗,這時(shí)候,二抗就不能選擇山羊或者小鼠來源的。。
- 選擇哪種形式的二抗
是整個(gè)IgG分子,F(xiàn)(ab')2片段,還是Fab片段?
整個(gè)IgG分子:此種抗體適用于多數(shù)情況。
F(ab')2片段:該種抗體是由兩個(gè)靠二硫鍵連接的用于結(jié)合抗原的Fab片段組成, 這些抗體用在特定的情況中,如需要避免抗體與具有Fc受體的細(xì)胞結(jié)合的情況。
Fab片段:它們只有一個(gè)結(jié)合位點(diǎn),一般用來封閉內(nèi)源性免疫球蛋白。