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噬菌體展示技術(shù)篩選抗體的基本原理

日期:2023-10-11 16:39:53


    噬菌體展示技術(shù)是利用噬菌體顆粒作為載體來展示外源多肽、蛋白或抗體等生物分子的方法,它被廣泛應用于新藥開發(fā)、蛋白質(zhì)相互作用研究、腫瘤標志物篩選等領(lǐng)域。其中,基于噬菌體展示技術(shù)的抗體篩選被稱為“噬菌體抗體庫篩選技術(shù)”,其基本原理如下:
 
    構(gòu)建噬菌體抗體庫:將目標抗原進行純化或合成,并將其分別與噬菌體表面展示有抗體成分(抗體庫)的噬菌體進行結(jié)合。這樣可以構(gòu)建出具有大量不同抗體成分(多肽抑或Fv抗體片段)的噬菌體抗體庫。
 
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    篩選與抗原結(jié)合的噬菌體:將目標抗原涂覆在固定的載玻片上,隨后將噬菌體抗體庫加入到載玻片上,讓其與抗原結(jié)合,以便檢測哪些噬菌體能夠與抗原結(jié)合。將未與抗原結(jié)合的噬菌體洗去后,固定于載玻片上與抗原結(jié)合的噬菌體便可進一步進行篩選和鑒定。
 
    鑒定并提取所需抗體:對篩選出來的噬菌體進行克隆擴增,以獲得其DNA序列信息,并用來表達單克隆抗體。而后可以將這些單克隆抗體進行進一步的鑒定,提取其中具有最佳特性的抗體,用于后續(xù)研究。
 
    噬菌體展示技術(shù)是一種高效的抗體篩選技術(shù),其利用載體噬菌體,在細胞水平上展示各類多肽、蛋白或抗體等生物分子,借此實現(xiàn)了高通量的抗體篩選,為抗體藥物開發(fā)提供了新的途徑。