雜交瘤細(xì)胞技術(shù)制備單抗過程
日期:2023-10-18 16:43:34
雜交瘤細(xì)胞技術(shù)制備單抗的過程主要包括以下步驟:
免疫原制備:根據(jù)需要制備免疫原。一般常用的免疫原包括純化的蛋白質(zhì)、多肽、核酸等。
免疫動物免疫:將免疫原注射到小鼠等合適的實(shí)驗(yàn)動物體內(nèi),以誘導(dǎo)其產(chǎn)生特異性抗體。
脾細(xì)胞分離:將免疫后的小鼠脾臟取出,分離其中的淋巴細(xì)胞。
癌細(xì)胞系培養(yǎng):將癌細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng),并在合適的時(shí)機(jī)添加抑制劑,以抑制癌細(xì)胞的快速增殖。
篩選配對:將淋巴細(xì)胞與癌細(xì)胞系進(jìn)行雜交,形成雜交瘤細(xì)胞。通過選擇性培養(yǎng)、限稀擴(kuò)增等方法對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行篩選和配對,以得到產(chǎn)生單種特異性抗體的細(xì)胞株。
單克隆細(xì)胞培養(yǎng):將得到的單克隆細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),并收集其上清液中的單克隆抗體。
單克隆抗體純化:對上清液中的抗體進(jìn)行純化、濃縮等操作,以得到高質(zhì)量的單克隆抗體制品。
雜交瘤細(xì)胞技術(shù)是制備單克隆抗體的主要方法之一。它能夠利用小鼠等動物體內(nèi)產(chǎn)生的特異性抗體,將其與癌細(xì)胞融合,從而形成持續(xù)產(chǎn)生單種抗體的雜交瘤細(xì)胞。該技術(shù)可以用于制備各種類型的單抗,具有廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。
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